产品货号:
WH0008
中文名称:
土壤DNA提取试剂盒(离心吸附柱法)
英文名称:
Extraction kit for genomic DNA from soil
产品规格:
50次
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒采用独特的脱腐缓冲液系统,可以将土壤样本中的腐殖酸尽可能的去除,并且配有的玻璃珠可有效破碎土壤样本中的各种复杂成分,保证从土壤中提取基因组DNA的完整性。使用本试剂盒回收的DNA杂质少,完整性好,可直接用于PCR、酶切等其它分子生物学下游实验。
产品特点:
·适用范围广:适用于花坛土、花盆土、农田土、山林土、淤泥、红土、黑土、粉尘等多类土壤环境样本的提取。
·操作便捷:能够集中在相对较短时间内完成实验操作。
·高纯度:与离心柱法纯化相结合,提取的DNA纯度很高,可直接用于下游实验。
提取实例:
土壤基因组DNA提取,起始量:250mg,50μl洗脱,5μl上样,1%琼脂糖凝胶电泳结果。
1、黑龙江凉水自然保护区,黑土
2、广东鼎湖山,红土
3、北京东录山自然保护区,黄土
4、浙江古田山,红土
5、西双版纳补蛙自然,红土
6、实验室粉尘
7、山林土
8、淤泥
9、农田土
10、花盆土
11、花坛土
以提取的土壤基因组为模板,进行PCR,20μl PCR体系采取6μl电泳的结果。
1、黑龙江凉水自然保护区,黑土
2、广东鼎湖山,红土
3、北京东录山自然保护区,黄土
4、西双版纳补蛙自然,红土
5、实验室粉尘
6、山林土
7、花盆土
8、花坛土
9、浙江古田山红土
10、淤泥
11、农田土
试剂盒组成:
保存条件:室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月;更长时间的保存可置于2-8℃。在2-8℃保存条件下,若产生沉淀,使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。
注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1.新采取的土壤样本会得到更高的产率,不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。
2.所有的离心步骤均为使用台式离心机,室温下离心。
3.在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀,否则会堵塞吸附柱,并影响产物纯度。
4.漂洗液PWS使用前请参照瓶上标签加入无水乙醇。
5.过量的DNA可能抑制下游PCR反应,遇到这种情况建议将DNA模板进行稀释后试用。
使用方法:
使用前请先在漂洗液PWS中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
1.取750μl缓冲液SA和0.25 g研磨珠至2 ml离心管中。
2.在上述2 ml离心管中加入土壤样本0.25 g,涡旋混匀15 sec。
3.向样本中加入60 μl缓冲液SC,涡旋振荡10min至样本混匀。
注意:使用前检查缓冲液SC是否有沉淀,若有沉淀,请在37℃加热至完全溶解后使用。
4.12000rpm(~13400×g)离心1 min。转移上清液(约500 μl)至新的2 ml离心管。
5.加入250 μl缓冲液HA,涡旋5 sec,4℃放置5 min。
6.12000rpm(~13400×g)离心1 min。转移上清至新的2 ml离心管,加入200 μl缓冲液HB混匀,4℃放置5 min。
注意:转移上清时不要移走沉淀,否则可能降低DNA纯度。
7.12000rpm(~13400×g)离心1 min。转移上清液至新的2 ml离心管,加入1200 μl缓冲液GF颠倒混匀。
注意:转移上清时不要移走沉淀,否则可能降低DNA纯度。
8.取上一步所得溶液700 μl加入到一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13400×g)离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
注意:吸附柱最大容量为700 μl,请分多次过柱。
9.向吸附柱CB3中加入500 μl漂洗液PWS (用前请加入无水乙醇),12000rpm(~13400×g)离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
10.向吸附柱CB3中加入500 μl 70%乙醇,12000rpm(~13400×g)离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
11.12000rpm (~13400×g)离心2 min,倒掉废液。
12.将吸附柱CB3置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100 μl洗脱缓冲液TE,室温放置2-5 min,12000rpm (~13400×g )离心2 min,将溶液收集到离心管中。
DNA浓度及纯度检测:
1.得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
2.DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40/ml单链DNA。
3.OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
相关搜索:土壤DNA提取试剂盒(离心吸附柱法),土壤基因组DNA提取试剂盒,土壤中的gDNA提取试剂盒,Extraction kit for genomic DNA from soil
产品特点:
·适用范围广:适用于花坛土、花盆土、农田土、山林土、淤泥、红土、黑土、粉尘等多类土壤环境样本的提取。
·操作便捷:能够集中在相对较短时间内完成实验操作。
·高纯度:与离心柱法纯化相结合,提取的DNA纯度很高,可直接用于下游实验。
提取实例:
土壤基因组DNA提取,起始量:250mg,50μl洗脱,5μl上样,1%琼脂糖凝胶电泳结果。
1、黑龙江凉水自然保护区,黑土
2、广东鼎湖山,红土
3、北京东录山自然保护区,黄土
4、浙江古田山,红土
5、西双版纳补蛙自然,红土
6、实验室粉尘
7、山林土
8、淤泥
9、农田土
10、花盆土
11、花坛土
以提取的土壤基因组为模板,进行PCR,20μl PCR体系采取6μl电泳的结果。
1、黑龙江凉水自然保护区,黑土
2、广东鼎湖山,红土
3、北京东录山自然保护区,黄土
4、西双版纳补蛙自然,红土
5、实验室粉尘
6、山林土
7、花盆土
8、花坛土
9、浙江古田山红土
10、淤泥
11、农田土
试剂盒组成:
组分 | 50T |
缓冲液SA | 45ml |
缓冲液SC | 5 ml |
缓冲液HA | 15 ml |
缓冲液HB | 15 ml |
缓冲液GF | 70 ml |
漂洗液PWS | 15 ml |
1mm研磨珠 | 15g |
洗脱缓冲液TE | 15 ml |
吸附柱CB3 | 50个 |
收集管(2 ml) | 50个 |
保存条件:室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月;更长时间的保存可置于2-8℃。在2-8℃保存条件下,若产生沉淀,使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。
注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1.新采取的土壤样本会得到更高的产率,不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。
2.所有的离心步骤均为使用台式离心机,室温下离心。
3.在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀,否则会堵塞吸附柱,并影响产物纯度。
4.漂洗液PWS使用前请参照瓶上标签加入无水乙醇。
5.过量的DNA可能抑制下游PCR反应,遇到这种情况建议将DNA模板进行稀释后试用。
使用方法:
使用前请先在漂洗液PWS中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
1.取750μl缓冲液SA和0.25 g研磨珠至2 ml离心管中。
2.在上述2 ml离心管中加入土壤样本0.25 g,涡旋混匀15 sec。
3.向样本中加入60 μl缓冲液SC,涡旋振荡10min至样本混匀。
注意:使用前检查缓冲液SC是否有沉淀,若有沉淀,请在37℃加热至完全溶解后使用。
4.12000rpm(~13400×g)离心1 min。转移上清液(约500 μl)至新的2 ml离心管。
5.加入250 μl缓冲液HA,涡旋5 sec,4℃放置5 min。
6.12000rpm(~13400×g)离心1 min。转移上清至新的2 ml离心管,加入200 μl缓冲液HB混匀,4℃放置5 min。
注意:转移上清时不要移走沉淀,否则可能降低DNA纯度。
7.12000rpm(~13400×g)离心1 min。转移上清液至新的2 ml离心管,加入1200 μl缓冲液GF颠倒混匀。
注意:转移上清时不要移走沉淀,否则可能降低DNA纯度。
8.取上一步所得溶液700 μl加入到一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13400×g)离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
注意:吸附柱最大容量为700 μl,请分多次过柱。
9.向吸附柱CB3中加入500 μl漂洗液PWS (用前请加入无水乙醇),12000rpm(~13400×g)离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
10.向吸附柱CB3中加入500 μl 70%乙醇,12000rpm(~13400×g)离心30 sec,倒掉废液,将吸附柱CB3放入收集管中。
11.12000rpm (~13400×g)离心2 min,倒掉废液。
12.将吸附柱CB3置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100 μl洗脱缓冲液TE,室温放置2-5 min,12000rpm (~13400×g )离心2 min,将溶液收集到离心管中。
DNA浓度及纯度检测:
1.得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
2.DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40/ml单链DNA。
3.OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
相关搜索:土壤DNA提取试剂盒(离心吸附柱法),土壤基因组DNA提取试剂盒,土壤中的gDNA提取试剂盒,Extraction kit for genomic DNA from soil